ლიზისის ხსნარი 30 სმ 3,

სარეცხი ხსნარი 1 30 სმ 3,

საწმენდი ხსნარის კონცენტრატი 2 20 სმ 3,

სორბენტი სუსპენზია 2 სმ 3,

დნმ ელუციის ბუფერი 4 სმ 3 .

ოპერაციული პროცედურა:

მოამზადეთ გამწმენდი ხსნარი 2 კომპლექტიდან 20 სმ 3 კონცენტრატის, 80 სმ 3 გამოხდილი წყლის და 100 სმ 3 96% ეთანოლის შერევით ცალკე ბოთლში. შეინახეთ ხსნარი ოთახის ტემპერატურაზე მჭიდროდ დახურულ ბოთლში.

შეამოწმეთ სორბენტის მდგომარეობა - დნობისას მან უნდა დაიკავოს სუსპენზიის მოცულობის დაახლოებით ნახევარი.

მჭიდროდ დახურულ 1,5 სმ 3 პოლიპროპილენის მილში (სასურველია ხრახნიანი თავსახურით), დაამატეთ 100 μl წინასწარ მომზადებული ტესტის ნიმუში, უარყოფითი ან დადებითი ნიმუში, დაამატეთ 300 μl ლიზისური ხსნარი (თითოეულ ნიმუშს ცალკე წვერით) და აურიეთ. საფუძვლიანად 3-10-ჯერ პიპეტირებით.

დაამატეთ 15 - 20 μl ხელახლა სორბენტი, კარგად აურიეთ მორევით, მოათავსეთ თაროში 5-7 წუთის განმავლობაში სორბენტის სრული დალექვისთვის.

დაასხით სორბენტი მიკროცენტრიფუგაში 30 წამის განმავლობაში 3-8 ათასი ბრ/წთ-ზე. აიღეთ სუპერნატანი თითოეული მილიდან ცალკე წვერის გამოყენებით (მოხერხებულია ვაკუუმ შეწოვის გამოყენება).

დაუმატეთ 300 მკლ სარეცხი ხსნარი 1, აურიეთ მორევით, სანამ სორბენტი სრულად არ შეჩერდება (თუ სორბენტი ცუდად დაიშლება, დაასხით იგი პიპეტით), მოათავსეთ ცენტრიფუგაში 4-8 ათასი ბრ/წთ 30 წამის განმავლობაში. შეაგროვეთ სუპერნატანტი თითოეული მილიდან ცალკე წვერის გამოყენებით.

დაამატეთ 800 მკლ სარეცხი ხსნარი 2, მორევა, სანამ სორბენტი სრულად არ შეჩერდება, დაასხით მიკროცენტრიფუგაში 6-10 ათასი ბრ/წთ 30 წამის განმავლობაში და შეაგროვეთ სუპერნატანტი.

გაიმეორეთ ნაბიჯი 6, ფრთხილად შეარჩიეთ სუპერნატანი, გააშრეთ სორბენტის ნალექი თერმოსტატში 65 °C-ზე 5 წუთის განმავლობაში.

სორბენტი ხელახლა შეაჩერეთ 30-40 მკლ გამორეცხვის ბუფერში, მოათავსეთ თერმოსტატში 65°C-ზე 5 წუთის განმავლობაში, პერიოდულად შეანჯღრიეთ მორევით.

დაასხით მიკროცენტრიფუგაში მაქსიმალური სიჩქარით 1 წუთის განმავლობაში.

ნიმუში მზად არის PCR-სთვის, სუპერნატანტი შეიცავს გასუფთავებულ დნმ-ს.

როგორც უარყოფითი კონტროლი დნმ-ის ექსტრაქციის საფეხურზე აუცილებელია მარილიანი ან დეიონირებული წყლის გამოყენება.

დნმ-ის ექსტრაქციის ეფექტურობა დნმ-სორბ-PCR ნაკრების გამოყენებით არის 30 – 60%.

კლინიკური მასალა	პლაზმა, შრატი	სკრაპინგი, სპერმატოზოიდი, ფარინგეალური გამორეცხვა, შარდი	ბიოფსია, სისხლი, განავალი
პიპეტინგების რაოდენობა
სორბენტის მოცულობა
სორბენტის დეპონირების მაჩვენებელი	8 ათასი ბრ/წთ	6 ათასი ბრ/წთ	3-4 ათასი ბრ/წთ
ელუენტის მოცულობა
დნმ-ის ექსტრაქციის ეფექტურობა

5.2. ეტაპი 2. ნაკრების PCR შემადგენლობის დაყენება PCR გაძლიერებისთვის:

5x რეაქციის ბუფერი 1000 μl (ბლანტი, გამჭვირვალე ლურჯი ხსნარი)

დეიონიზებული წყალი.2000 μl

ნუკლეოტიდების ნარევი.500 μl

Taq პოლიმერაზა.100 μl

პრაიმერის ნარევი.500 μl

ცვილი PCR-ისთვის.2000 μl

დადებითი კონტროლი: 100 მკლ

უარყოფითი კონტროლი 100 მკლ

მინერალური ზეთი 4000 μl

ნაკრები ინახება მინუს 20°C ტემპერატურაზე ერთი წლის განმავლობაში.

დნმ-ის მიკროსვეტის სწრაფი ექსტრაქციის მეთოდი შექმნილია მთლიანი დნმ-ის ამოღებისთვის სისხლიდან, პლაზმიდან, ნერწყვიდან, შარდიდან, უჯრედული კულტურებიდან და ნებისმიერი უჯრედის მარცვლებიდან ბუფერში. იზოლირებული დნმ-ის მაღალი სისუფთავე საშუალებას იძლევა გამოიყენოს იგი ყველა სახის ანალიზისთვის.

იზოლაციის დრო მერყეობს 30-დან 45 წუთამდე, ნიმუშების რაოდენობის მიხედვით;

დნმ-ის ეფექტური შეკავშირება სვეტის მემბრანასთან შესაძლებელს ხდის მიღებას უმაღლესი მოსავლიანობადნმ ნიმუშიდან;
გაწმენდის მაღალი ხარისხი მიიღწევა ლიზინგისა და სარეცხი ხსნარების კომპონენტების ოპტიმიზებული შემადგენლობის წყალობით;
მნიშვნელოვნად შემცირდა ფრაგმენტაცია და დნმ-ის დაკარგვა გარეცხვის დროს სხვა სორბენტის ექსტრაქციის მეთოდებთან შედარებით;
შესაძლებელია დნმ-ის კონცენტრაცია სარეცხი ხსნარის მოცულობის შემცირებით;
სვეტებზე დნმ-ის მოპოვება მნიშვნელოვნად ამცირებს დამატებითი პლასტმასის მოხმარებას;
ნიმუშის მაქსიმალური მოცულობა - 200 μl;
ნაკრები შეიცავს პროტეინაზა K;
იზოლირებული დნმ-ის სისუფთავე არის 1,8-1,9 A260/A280 თანაფარდობის მიხედვით;
ამოღებული დნმ-ის რაოდენობა დამოკიდებულია ნიმუშის ტიპზე და რაოდენობაზე. დნმ-ის გამოსავალი 200 μl სისხლიდან საშუალოდ 5-6 მკგ.

რეაგენტების ნაკრები გენომიური დნმ-ის იზოლირებისთვის "დნმ-ექსტრანი"

დნმ-ექსტრანის სერიის გენომიური დნმ-ის იზოლაციის ნაკრების გამოყენებით, შეგიძლიათ იზოლირება დნმ-ის სხვადასხვა ბიოლოგიური მასალისგან: სისხლი, ბაქტერიული და ცხოველური უჯრედების კულტურები, ცხოველებისა და მცენარეების ახალი, გაყინული ან გამხმარი ქსოვილები.

უჯრედებიდან დნმ-ის სრული ექსტრაქცია, დნმ-ის დაკარგვის და ფრაგმენტაციის მინიმუმამდე შემცირება გაწმენდის დროს;
იზოლირებულ დნმ-ს აქვს მაღალი დონესისუფთავე (ფარდობა A260/A280 = 1.8-1.9) და შესაფერისია PCR, შეზღუდვის მონელებისთვის, ჰიბრიდიზაციისთვის და სხვა კვლევებისთვის;
ნაკრები არ შეიცავს პოტენციურად საშიშ კომპონენტებს, როგორიცაა ფენოლი და ქლოროფორმი და არ საჭიროებს მაღალი ნაკადის სიჩქარეპლასტმასის და არ ქმნის ტოქსიკურ ნარჩენებს.

რეაგენტების კომპლექტი დნმ-ის ექსტრაქციისთვის მაგნიტურ ნაწილაკებზე "M-Sorb-Tube"

ადაპტირებულია მიკობაქტერიული დნმ-ის იზოლირებისთვის ნახველის, ბრონქული გამორეცხვის, ცერებროსპინალური სითხის, ექსუდატის, პუნქტუაციის, ბიოფსიის, შარდის, გენიტალური ტრაქტის გამონადენისა და უჯრედული კულტურებისგან. კლინიკური მასალის წინასწარი დამუშავება ტარდება მიკრობიოლოგიური კვლევებისთვის ნიმუშის მომზადების სტანდარტული პროცედურების შესაბამისად (რუსეთის ფედერაციის ჯანდაცვის სამინისტროს 2003 წლის 21 მარტის ბრძანება No109 „ტუბერკულოზის საწინააღმდეგო ღონისძიებების გაუმჯობესების შესახებ რუსეთის ფედერაცია“, დანართი 11 „ინსტრუქციები მიკრობიოლოგიური კვლევების ერთიანი მეთოდების შესახებ ტუბერკულოზის გამოვლენის, დიაგნოსტიკისა და მკურნალობისთვის“). კლინიკური მასალის ინაქტივაციისთვის, ჩვენ გირჩევთ გამოიყენოთ ჩვენ მიერ შემუშავებული ინაქტივაციის ხსნარი.

ხსნარი A კლავს მიკობაქტერიებს 12 საათის განმავლობაში და ახდენს კლინიკურ მასალის დეზინფექციას, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას შემდგომი ანალიზისთვის (დნმ-ის ექსტრაქცია, PCR და ა.შ.). ხსნარი A ადაპტირებულია სპეციალურად ნახველის სამკურნალოდ და მთლიანად ცვლის სტანდარტულ პროცედურას NaOH-NALC ხსნარის გამოყენებით და აქვს განსაკუთრებული მუკოლიზური თვისებები. ინაქტივაციის ხსნარი A ზრდის დნმ-ის გამოსავლიანობას სტანდარტული NaOH-NALC ნიმუშის მომზადებასთან შედარებით.

იზოლაციის ტექნიკა მოიცავს: დნმ-ის ლიზას გუანიდინის იზოთიოციანატით, დნმ-ის სორბციას მაგნიტურ ნაწილაკებზე, დნმ-ის დალექვას ცენტრიფუგაციით, გამორეცხვის ეტაპებს და დნმ-ის ელუციას. შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვა მიკროორგანიზმებისგან დნმ-ის იზოლირებისთვის.

სილიკა გელით დაფარული მაგნიტური ნაწილაკების გამოყენება სორბენტად არის ტექნოლოგიურად უფრო მოწინავე და მოსახერხებელი ფორმატი სხვა სორბენტებთან შედარებით და იძლევა დნმ-ის ექსტრაქციის ტექნიკის მაქსიმალურ სტანდარტიზაციას და ავტომატიზაციას;

თითოეულ სატესტო ნიმუშს ემატება შიდა დადებითი კონტროლი (IPC) RT-PCR ინჰიბიტორების არსებობა/არარსებობა და დნმ-ის ექსტრაქციის ეფექტურობა განისაზღვრება IPC გაძლიერების რეაქციით.

რეაგენტის კომპლექტები დნმ-ის მოპოვებისთვის საკვები პროდუქტებიდან და საკვები ნედლეულიდან

"Sorb-GMO-A" და "Sorb-GMO-B" რეაგენტების ნაკრები შექმნილია სპეციალურად მცენარეული მასალებიდან დნმ-ის მოპოვებისთვის. საკვები პროდუქტებიდა შესანახი. ორივე ნაკრები იყენებს სილიციუმის სორბენტს დნმ-ის გასაწმენდად. "Sorb-GMO-A" შეიცავს გუანიდინ ქლორიდს, როგორც ლიზინგის აგენტს, "Sorb-GMO-B" არის იონური CTAB სარეცხი საშუალება, რომელიც უზრუნველყოფს მცენარის კომპონენტებიდან დნმ-ის მაქსიმალურ გამოსავალს. Გამორჩეული მახასიათებლები Sorb-GMO-A ნაკრების უპირატესობებია დნმ-ის ექსტრაქციის სიჩქარე და ქლოროფორმის არარსებობა, რაც კომპლექტთან მუშაობას უფრო უსაფრთხოს ხდის.

წყლის ნიმუშებიდან (მაგნიტურ ნაწილაკებზე) დნმ-ის ამოღების რეაგენტების ნაკრები "M-Sorb-Leg"

შექმნილია ლეგიონელას დნმ-ის იზოლაციისთვის წყლის სხეულები გარემო(გამაგრილებელი კოშკები, საცურაო აუზები, წყლის პარკები, ცხელი და ცივი წყალმომარაგების სისტემები). ლეგიონელას მინიმალური იზოლირებული კონცენტრაცია არის 100 უჯრედი 0,5 ლიტრ ნიმუშზე.

"M-Sorb-Leg" ნაკრები იწარმოება ორი მოდიფიკაციით: "M-Sorb-Leg1000" წყლის ნიმუშებისთვის 1-1000 მლ მოცულობით და "M-Sorb-Leg1" წყლის ნიმუშებისთვის, მდე მოცულობით. 1 მლ. M-Sorb-Leg1000 კომპლექტი უზრუნველყოფს წყლის ფილტრაციას პოლიკარბონატის ფილტრის გამოყენებით.

M-Sorb-Leg რეაგენტების ნაკრები საშუალებას გაძლევთ მოიცილოთ PCR ინჰიბიტორები, რომლებიც გვხვდება ძლიერ დაბინძურებულ წყლის ნიმუშებში;

დნმ-ის იზოლაციის ტექნიკა ეფუძნება დნმ-ის სორბციას სილიკა გელით დაფარულ მაგნიტურ ნაწილაკებზე, რასაც მოჰყვება დალექვა დალექილი რეაგენტით. აერთიანებს სორბციის მეთოდებისა და მთლიანი ნალექების მეთოდის უპირატესობას;
თითოეულ სატესტო ნიმუშს ემატება შიდა დადებითი კონტროლი (IPC) RT-PCR ინჰიბიტორების არსებობა/არარსებობა განისაზღვრება IPC გაძლიერების რეაქციით.

რეაგენტების კომპლექტი დნმ-ის მოპოვებისთვის გარემოს ობიექტებიდან (მაგნიტურ ნაწილაკებზე) "M-Sorb-OOM"

M-Sorb-OOM რეაგენტების ნაკრები განკუთვნილია დნმ-ის იზოლირებისთვის გარემოს ობიექტებიდან (ნიადაგი, წყალი, ცხოველების გვამები და ა.შ.), რომლებიც ეჭვმიტანილია განსაკუთრებით საშიში მიკროორგანიზმებით (DOM) ინფიცირებულად, რათა მოამზადოს ისინი შემდგომი ანალიზისთვის. RT-PCR. იზოლაციის პროცედურა მსგავსია M-Sorb-Leg ნაკრებისთვის აღწერილის.

რეაგენტების ნაკრები რნმ-ის იზოლაციისთვის "რნმ-ექსტრანი"

ნაკრები განკუთვნილია რნმ-ის იზოლირებისთვის სისხლიდან, ქსოვილის ფრაგმენტებიდან და უჯრედული კულტურებიდან. RNA-Extran ნაკრების გამოყენებით მიღებული რნმ შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც RT-PCR, ასევე ჰიბრიდიზაციის ანალიზისთვის, ინ ვიტრო ტრანსლაციისთვის და კლონირებისთვის.

რნმ-ის იზოლაციის პრინციპი ემყარება მჟავე ფენოლის ექსტრაქციას ხომჩინსკის მიხედვით, რომელშიც წყლის ფაზარჩება მხოლოდ რნმ, დნმ კი ცილებთან კომპლექსში გადადის ორგანულ ფაზაში. გუანიდინის თიოციანატი გამოიყენება როგორც უჯრედული ნუკლეაზების საიზოლაციო და დენატურირებადი აგენტი.

საშუალებას გაძლევთ მიიღოთ მაღალგანწმენდილი რნმ, თავისუფალი დნმ-ის მინარევებისაგან;

უზრუნველყოფს რნმ-ის სრულ ექსტრაქციას მთლიანი სისხლიდან, ქსოვილის ფრაგმენტებიდან და უჯრედული კულტურებიდან;

საშუალებას გაძლევთ მიიღოთ დაუზიანებელი რნმ;

რნმ-ის იზოლაციის დრო - 1 საათი.

კატალოგის ნომერი	სახელი	რეაქციების რაოდენობა
EX-509	რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-1" გენომიური დნმ-ის იზოლირებისთვის მთელი სისხლიდან	100
EX-511	რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-2" დნმ-ის ექსტრაქციისთვის ცხოველთა და ადამიანის ქსოვილებიდან	100
EX-512	რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-3" ბაქტერიული კულტურებიდან დნმ-ის იზოლაციისთვის	100
EX-513	რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-4" მცენარეული ქსოვილებიდან დნმ-ის ექსტრაქციისთვის	100
EX-514	რეაგენტების ნაკრები "K-Sorb" მთლიანი დნმ-ის იზოლაციისთვის სვეტებზე (სისხლი, ნერწყვი, შარდი, უჯრედული კულტურები, ეპითელური უჯრედების სკრაპი)	100
EX-515	რეაგენტების ნაკრები "რნმ-ექსტრანი" რნმ-ის იზოლირებისთვის სისხლიდან, ქსოვილებიდან, უჯრედული კულტურებიდან	50
OM-505	რეაგენტების ნაკრები "M-Sorb-Tub" დნმ-ის ექსტრაქციისთვის კლინიკური ნიმუშებიდან და უჯრედული კულტურებიდან (მაგნიტურ ნაწილაკებზე)	50 თუ 100
GM-502-50	"SORB-GMO-A" (გუანიდინი + სორბენტი) მცენარეული მასალებიდან და საკვები პროდუქტებიდან დნმ-ის ექსტრაქციის რეაგენტების ნაკრები	50
GM-503-50	"SORB-GMO-B" (CTAB + სორბენტი) მცენარეული მასალებიდან და საკვები პროდუქტებიდან დნმ-ის ექსტრაქციის რეაგენტების ნაკრები	50
OM-506	რეაგენტების კომპლექტი "M-Sorb-Leg1000" ლეგიონელას დნმ-ის იზოლაციისთვის წყლის ნიმუშებიდან 1000 მლ-მდე (მაგნიტურ ნაწილაკებზე, ფილტრები მოწოდებულია ცალკე)	50 თუ 100
OM-507	რეაგენტების კომპლექტი "M-Sorb-Leg1" ლეგიონელას დნმ-ის იზოლაციისთვის წყლის ნიმუშებიდან 1 მლ-მდე (მაგნიტურ ნაწილაკებზე)	50 თუ 100
OOM-502	რეაგენტების კომპლექტი "M-sorb-OOM" დნმ-ის მოპოვებისთვის გარემოს ობიექტებიდან (მაგნიტურ ნაწილაკებზე)	50 თუ 100

Შეკვეთის ინფორმაცია

სახელი	მოცულობა	წარმოება	მეთოდი	კატა.არა.
"GMO-MagnoSorb" (გუანიდინი + მაგნიტური სორბენტი) რეაგენტების ნაკრები მცენარეული მასალებიდან და საკვები პროდუქტებიდან დნმ-ის ექსტრაქციისთვის	50 გამოყოფა	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	GM-505-50
"SORB-GMO-A" (გუანიდინი + სორბენტი) მცენარეული მასალებიდან და საკვები პროდუქტებიდან დნმ-ის ექსტრაქციის რეაგენტების ნაკრები	50	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	GM-502-50-50
"SORB-GMO-B" (CTAB + სორბენტი) მცენარეული მასალებიდან და საკვები პროდუქტებიდან დნმ-ის ექსტრაქციის რეაგენტების ნაკრები	50	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	GM-503-50-50
რეაგენტების კომპლექტი "Amplitub-RV" ნაკრები No1 ("M-Sorb-Tub") მიკობაქტერიული დნმ-ის იზოლირებისთვის კლინიკური ნიმუშებიდან და კულტურის უჯრედებიდან (მაგნიტურ ნაწილაკებზე)	50	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	OM-505
რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-1" გენომიური დნმ-ის იზოლირებისთვის მთელი სისხლიდან	100	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	EX-509-100
რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-2" დნმ-ის ექსტრაქციისთვის ცხოველთა და ადამიანის ქსოვილებიდან	100	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	EX-511
რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-3" ბაქტერიული კულტურებიდან დნმ-ის იზოლაციისთვის	100	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	EX-512-100
რეაგენტების ნაკრები "დნმ-ექსტრან-3" მცენარეული ქსოვილებიდან დნმ-ის ექსტრაქციისთვის	100	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	EX-513-100
რეაგენტების ნაკრები "K-Sorb" მთლიანი დნმ-ის იზოლაციისთვის სვეტებზე (სისხლი, ნერწყვი, შარდი, უჯრედული კულტურები, ეპითელური უჯრედების სკრაპი)	100	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	EX-514-100
	48 რეაქცია	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	GM-443-48
რეაგენტების ნაკრები „სოია / 35S+FMV / NOS სკრინინგი“	50 რეაქცია	სინთოლი	რეალურ დროში PCR	GM-416-50

"დნმ-სორბ-ს-მ" ® AmpliSens FBUN როსპოტრებნადზორის ეპიდემიოლოგიის ცენტრალური კვლევითი ინსტიტუტი, მხოლოდ კვლევისთვის რუსეთის ფედერაცია, 111123, და სხვა არასამედიცინო მიზნებისათვის, მოსკოვი, ..."

ინსტრუქციები

რეაგენტის ნაკრების გამოყენებაზე

ბიოლოგიური მასალისგან დნმ-ის მოპოვებისთვის

"დნმ-სორბ-ს-მ"

AmpliSense

FBUN ეპიდემიოლოგიის ცენტრალური კვლევითი ინსტიტუტი

როსპოტრებნადზორი,

მხოლოდ კვლევის მიზნებისთვის

რუსეთის ფედერაცია, 111123,

და სხვა არასამედიცინო მიზნებისთვის

ქალაქი მოსკოვი, ნოვოგირეევსკაიას ქუჩა, შენობა 3A

აბრევიატურების სია

მიზანი

მეთოდის პრინციპი

შევსების ფორმები

დნმ-ის ექსტრაქცია ბიოლოგიური მასალისგან ცხოველებიდან................ 8

ცხოველთა საკვები ან მცენარეული ნედლეული

ბეჭდურ პროდუქტებში გამოყენებული სიმბოლოები

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 2 / 15-დან

აბრევიატურების სია

ამ სახელმძღვანელოში გამოყენებულია შემდეგი აბრევიატურები და სიმბოლოები:

დნმ – დეზოქსირიბონუკლეინის მჟავა NA – ნუკლეინის მჟავები OK – უარყოფითი ექსტრაქციის კონტროლი NCO – უარყოფითი კონტროლის ნიმუში PC – დადებითი ექსტრაქციის კონტროლი PKO – დადებითი კონტროლის ნიმუში PCR – პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია

- Ფედერალური სახელმწიფოს მიერ დაფინანსებული ორგანიზაციამეცნიერებები

FBUN ცენტრალური კვლევითი ინსტიტუტი

"ეპიდემიოლოგიისა და ეპიდემიოლოგიის ცენტრალური კვლევითი ინსტიტუტი" ფედერალური სამსახურიროსპოტრებნადზორის სფეროში ზედამხედველობისთვის მომხმარებელთა უფლებებისა და ადამიანის კეთილდღეობის დაცვის მიზნით

მიზანი

დნმ-სორბ-S-M რეაგენტის ნაკრები განკუთვნილია ცხოველების ბიოლოგიური მასალისგან დნმ-ის ამოღებისთვის: ქსოვილის (ბიოფსია (კანისა და სასქესო სისტემის ლორწოვანი გარსები, კუჭ-ნაწლავის ტრაქტი, ბრონქები), ქირურგიული და აუტოფსიის მასალა; და დნმ-ის მოპოვება საკვებიდან, ბიოლოგიური დანამატებიდან, ცხოველების საკვებიდან ან მცენარეული მასალებიდან შემდგომი კვლევისთვის პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის (PCR) გამოყენებით.

დნმ-ის ექსტრაქცია არის PCR მეთოდის პრეანალიტიკური პროცედურა.

საცდელი ნიმუშის მოცულობა ექსტრაქციისთვის: 100 μl (დაშვებულია ნიმუშები 10-დან 100 μl მოცულობით ან 10-დან 100 მგ-მდე მასით)1.

ყურადღება! შეგროვების პროცედურის, ტესტირების მასალის ტრანსპორტირებისა და შენახვის პირობების, დნმ-ის ექსტრაქციისთვის მისი მომზადების საჭიროებისა და პროცედურის შესახებ ინფორმაციისთვის, აგრეთვე ნიმუშთან დაკავშირებული შემაფერხებელი ნივთიერებებისა და შეზღუდვების შესახებ იხილეთ ინსტრუქციები რეაგენტების ნაკრებისთვის. გამოიყენება გაძლიერებისთვის.

მეთოდის პრინციპი

ტესტის ნიმუში2 მუშავდება ლიზისური ხსნარით, რომელიც შეიცავს პროტეინაზა K-ს, რის შედეგადაც ხდება უჯრედის მემბრანების განადგურება და NK და უჯრედული კომპონენტების განთავისუფლება. გახსნილი NC-ები უკავშირდებიან სორბენტის ნაწილაკებს, ხოლო ლიზირებული ტესტის მასალის სხვა კომპონენტები რჩება ხსნარში და ამოღებულია სორბენტის ნალექის დროს.

ბიოლოგიური მასალის ზოგიერთი სახეობა მოითხოვს ნიმუშის მომზადების ეტაპს. Სმ.

ინსტრუქციები რეაგენტის ნაკრებისთვის, რომელიც გამოიყენება ამპლიფიკაციისთვის.

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 3 / 15-დან ცენტრიფუგირებით და სორბენტის შემდგომი გარეცხვით. როდესაც ელუციის ბუფერს ემატება სორბენტი, NC გადადის სილიციუმის ზედაპირიდან ხსნარში, რომელიც გამოყოფილია სორბენტის ნაწილაკებისგან ცენტრიფუგირებით. ამ პროცედურის შედეგად მიიღება ძლიერ გაწმენდილი NA პრეპარატი, თავისუფალი ამპლიფიკაციის რეაქციის ინჰიბიტორებისგან, რაც უზრუნველყოფს PCR კვლევის მაღალ ანალიტიკურ მგრძნობელობას.

შევსების ფორმები

რეაგენტის ნაკრები ხელმისაწვდომია 2 კონფიგურაციით:

ფორმა 1 მოიცავს რეაგენტების კომპლექტს „დნმ-სორბ-S-M“ ვერსია 50.

ფორმა 2 მოიცავს რეაგენტების კომპლექტს „დნმ-სორბ-S-M“ ვერსია 100.

სიფრთხილის ზომები და ინფორმაცია განადგურების შესახებ

ცხოველებისგან ბიოლოგიური მასალის შესწავლისას სამუშაო უნდა ჩატარდეს რუსეთის ფედერაციის სოფლის მეურნეობისა და ნავთობის სამინისტროს 1997 წლის 27 იანვრის No13-7-2/840 წესების შესაბამისად „დიაგნოსტიკაში მუშაობის ჩატარების წესები. ლაბორატორიები პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის მეთოდით. ძირითადი დებულებები”, დამტკიცებულია ვეტერინარული მედიცინის დეპარტამენტის მიერ.

საკვები პროდუქტების, ბიოლოგიური დანამატების, ცხოველების საკვების ან მცენარეული მასალების კვლევისას სამუშაო უნდა ჩატარდეს მოთხოვნების დაცვით. მეთოდოლოგიური ინსტრუქციები MU 1.3.2569-09 „ლაბორატორიების მუშაობის ორგანიზება ამპლიფიკაციის მეთოდების გამოყენებით ნუკლეინის მჟავაპათოგენურობის I–IV ჯგუფების მიკროორგანიზმების შემცველ მასალასთან მუშაობისას და GOST R 53214-2008 „საკვები. გენმოდიფიცირებული ორგანიზმებისა და მათგან მიღებული პროდუქტების გამოვლენის ანალიტიკური მეთოდები.

ზოგადი მოთხოვნები და განმარტებები“.

მუშაობისას ყოველთვის უნდა დაიცვან შემდეგი მოთხოვნები:

– ლაბორატორიული პროცესი უნდა იყოს ცალმხრივი. ანალიზი ტარდება ცალკეულ ოთახებში (ზონებში). სამუშაოები უნდა დაიწყოს ექსტრაქციის ზონაში და გაგრძელდეს გაძლიერებისა და გამოვლენის ზონაში. არ დააბრუნოთ ნიმუშები, აღჭურვილობა ან რეაგენტები იმ ადგილას, სადაც განხორციელდა პროცესის წინა ეტაპი.

– გამოუყენებელი რეაგენტები, ვადაგასული რეაგენტები, ასევე ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 4 15-დან გამოყენებული რეაგენტები, შეფუთვა3, ბიოლოგიური მასალა, მათ შორის მასალები, ინსტრუმენტები და დაბინძურებული ბიოლოგიური მასალა , უნდა განადგურდეს SanPiN 2.1.7.2790-10 „სამედიცინო ნარჩენების მართვის სანიტარული და ეპიდემიოლოგიური მოთხოვნების“ მოთხოვნების შესაბამისად.

– გამოიყენეთ და შეცვალეთ ერთჯერადი რჩევები ავტომატური ფილტრის პიპეტებისთვის ყოველი ოპერაციის დროს4. ერთჯერადი პლასტმასის ჭურჭელი უნდა განადგურდეს სპეციალურ ჭურჭელში, რომელიც შეიცავს სადეზინფექციო საშუალებას, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას დეზინფექციისთვის. სამედიცინო ნარჩენები.

– ნიმუშების მოსამზადებლად გამოყენებული ჭურჭელი (ნაღმტყორცნები და ღვეზელები) და ლითონის ინსტრუმენტები (სკალპელები, მაკრატელი, პინცეტები, ბლენდერის დანამატები და ა.შ.) ინახება სადეზინფექციო ხსნარში (მაგალითად, დიქლოროიზოციანური მჟავას ნატრიუმის მარილის 0,2% ხსნარში) ერთი საათის განმავლობაში. , დაიბანეთ ონკანის წყლით და ზედაპირულად აქტიური ნივთიერებებით სარეცხი საშუალებებიდა გამდინარე და დეიონიზებულ წყალში გარეცხვის შემდეგ აშრობენ მშრალ გაცხელებულ ღუმელში 4 საათის განმავლობაში 180C ტემპერატურაზე.

– რეაგენტის ნაკრები განკუთვნილია ერთჯერადი გამოყენებისთვის, განსაზღვრული რაოდენობის ნიმუშების შესასწავლად (იხ. განყოფილება „შემადგენლობა“).

– რეაგენტის ნაკრები მზად არის გამოსაყენებლად ამ ინსტრუქციის მიხედვით.

გამოიყენეთ რეაგენტის ნაკრები მკაცრად მისი დანიშნულებისამებრ.

- არ გამოიყენოთ რეაგენტის ნაკრები, თუ შიდა შეფუთვა დაზიანებულია ან გარეგნობარეაგენტი არ ემთხვევა აღწერილობას.

- არ გამოიყენოთ რეაგენტის ნაკრები, თუ არ არის დაცული ტრანსპორტირებისა და შენახვის პირობები ინსტრუქციის მიხედვით.

გამოუყენებელი რეაგენტები, ვადაგასული რეაგენტები, გამოყენებული რეაგენტები, შეფუთვა მიეკუთვნება სამედიცინო ნარჩენების საშიშ კლასს G.

ერთჯერადი წვერები ფილტრის გარეშე გამოიყენება ზენატანის მოსაშორებლად ექსტრაქციის პროცესში ვაკუუმ ასპირატორის გამოყენებით.

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 5 / 15-დან

- არ გამოიყენოთ რეაგენტის ნაკრები ვარგისიანობის ვადის გასვლის შემდეგ.

ნიმუშებთან და რეაგენტებთან მუშაობისას გამოიყენეთ ერთჯერადი ფხვნილისგან თავისუფალი ხელთათმანები, ლაბორატორიული ფენები და თვალის დამცავი საშუალებები. სამუშაოს დასრულების შემდეგ კარგად დაიბანეთ ხელები. ყველა ოპერაცია ტარდება მხოლოდ ხელთათმანებით, რათა თავიდან იქნას აცილებული ადამიანის სხეულთან კონტაქტი.

- მოერიდეთ ორთქლის ჩასუნთქვას, კანთან, თვალებთან და ლორწოვან გარსებთან კონტაქტს, არ გადაყლაპოთ. კონტაქტის შემთხვევაში დაუყოვნებლივ ჩამოიბანეთ დაზიანებული ადგილი წყლით და საჭიროების შემთხვევაში მიმართეთ ექიმს. სამედიცინო დახმარება.

– მოთხოვნის შემთხვევაში ხელმისაწვდომია რეაგენტის უსაფრთხოების მონაცემთა ფურცლები (SDS – უსაფრთხოების მონაცემთა ფურცელი).

სავარაუდო მოვლენების შეფასება, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს უარყოფითი შედეგებიადამიანის სხეულისთვის:

დანიშნულებისამებრ გამოყენებისას და ზემოაღნიშნული სიფრთხილის ზომების დაცვით, ადამიანის სხეულთან კონტაქტი გამორიცხულია.

საგანგებო სიტუაციებში შესაძლებელია შემდეგი:

- თვალების ლორწოვანი გარსის გაღიზიანება მგრძნობიარე ადამიანებში,

- კანის გაღიზიანება მგრძნობიარე ადამიანებში,

- ალერგიული რეაქცია,

- ზიანს აყენებს ჩასუნთქვისას,

- საზიანოა პერორალურად მიღების შემთხვევაში.

რეაგენტის ნაკრების სპეციფიკური ეფექტები ადამიანის სხეულზე:

– კანცეროგენული ეფექტიარდამსწრე.

- არ არსებობს მუტაგენური ეფექტი.

- არ აქვს რეპროდუქციული ტოქსიკურობა.

დამატებითი მასალები და აღჭურვილობა

(მწარმოებლების/მიმწოდებლების მითითებით):

1. 1.5 და 5.0 მლ ერთჯერადი პოლიპროპილენის ხრახნიანი ან მჭიდროდ დალუქული მილები (მაგ., Axygen, Inc.

("Exigen, Inc"), აშშ, ან მსგავსი).

2. ერთჯერადი რჩევები ცვლადი მოცულობის პიპეტებისთვის ფილტრით 200 და 1000 μl-მდე (მაგალითად, Axygen, Inc., აშშ, ან მსგავსი).

3. ერთჯერადი რჩევები ცვლადი მოცულობის პიპეტებისთვის 200 μl-მდე (მაგალითად, Axygen, Inc., აშშ, ან მსგავსი).

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 6 / 15-დან

4. თაროები 1,5 მლ მილებისთვის (მაგ. Axygen, Inc., აშშ, ან მსგავსი).

5. ლამინირებული ნაკადის გამწოვი, ბიოლოგიური უსაფრთხოების II კლასის A ტიპის (მაგალითად, „BAVp-01-“Laminar-S“-1,2“, სს „ლამინარული სისტემები“, რუსეთი, ან მსგავსი).

6. ეპენდორფის მილების თერმოსტატი 25-დან 100 °C-მდე (მაგალითად, SIA Biosan, ლატვია ან მსგავსი).

7. თერმოსტატ-შეიკერი ეპენდორფის მილებისთვის 25-დან 100 °C-მდე (მაგალითად, TS-100, SIA Biosan, ლატვია, ან მსგავსი).

8. მიკროცენტრიფუგა ეპენდორფის მილებისთვის მაქსიმალური სიჩქარეცენტრიფუგირება მინიმუმ 12 ათასი გ (მაგალითად, MiniSpin, Eppendorf (Eppendorf Manufacturing Corporation), Manufacturing Corporation Germany, ან მსგავსი).

9. Vortex (მაგალითად, SIA Biosan, ლატვია, ან მსგავსი).

10. სამედიცინო ვაკუუმ ასპირატორი ხაფანგის კოლბით ზენატანი სითხის მოსაშორებლად (მაგალითად, „OM-1“, შპს „უტესი“, რუსეთი ან მსგავსი).

11.ავტომატური ცვლადი მოცულობის დისპენსერები (მაგალითად, Biohit LLC, რუსეთი, ან მსგავსი).

12. მაცივარი 2-დან 8 °C-მდე საყინულე მინუს 24-დან მინუს 16 C-მდე.

13. ცალკე მოსასხამი, ქუდები, ფეხსაცმელი და ერთჯერადი ხელთათმანები MU 1.3.2569-09 მიხედვით.

14.ერთჯერადი პლასტმასის კონტეინერებიმასალების განკარგვისა და ინაქტივაციისთვის.

– – –

დნმ-ის ექსტრაქცია ბიოლოგიური მასალისგან ცხოველებისგან

2. აირჩიეთ საჭირო თანხა 1.5 მლ ერთჯერადი პოლიპროპილენის მილები ხრახნიანი ან მჭიდროდ დამაგრებული თავსახურებით (მათ შორის უარყოფითი და დადებითი ექსტრაქციის საკონტროლოები, თუ გათვალისწინებულია PCR ტესტირებისთვის).

ლიზის რეაგენტის ბუფერისა და სარეცხი ხსნარის 1 შენახვისას 2-დან 8 C ტემპერატურაზე, შესაძლებელია ნალექის წარმოქმნა კრისტალების სახით.

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 8 / 15-დან

3. დაამატეთ 10 μl BKO6 თითოეულ ტუბს (თუ ეს მოცემულია PCR კვლევისთვის). მილებს დაამატეთ 400 μl ლიზის რეაგენტის ბუფერი და 17 μl ლიზისის რეაგენტი.

4. დაამატეთ 100 μl ტესტის ნიმუშები6 მომზადებულ მილებს, თითოეული ნიმუშისთვის ფილტრით ცალკე წვერის გამოყენებით.

ყურადღება! 400 μl ბუფერი ლიზისის რეაგენტისთვის და 17 μl ლიზისის რეაგენტი შეიძლება დაემატოს ტუბს სატესტო ნიმუშის საჭირო რაოდენობით და 10 μl BKO7 შეიძლება დაემატოს იქ (თუ ეს მოცემულია PCR კვლევისთვის), ცალკეული რჩევების გამოყენებით ფილტრი.

5. დაამატეთ 100 μl NCO უარყოფითი კონტროლის (NC) ექსტრაქციის მილში, დაამატეთ 90 μl NCO და 10 μl PCO დადებითი კონტროლის (PC) ექსტრაქციის მილს (თუ ექსტრაქციის კონტროლი მოცემულია PCR კვლევებისთვის).6.

6. მჭიდროდ დაახურეთ სახურავები, კარგად აურიეთ და წვეთები მორევით.

მილები მოათავსეთ თერმოსტატში 64 °C ტემპერატურაზე 1 საათის განმავლობაში, პერიოდულად აურიეთ მორევით (5-ჯერ ყოველ 10-12 წუთში). ინკუბაცია დასაშვებია 12 საათის განმავლობაში 60 °C ტემპერატურაზე.

7. გაუხსნელი ნიმუშის ნაწილაკების მარცვლები ცენტრიფუგირებით 5 წუთის განმავლობაში 10 ათასი გ-ზე (მაგალითად, 12 ათასი ბრ/წთ MiniSpin მიკროცენტრიფუგასთვის, Eppendorf Manufacturing Corporation).

8. აიღეთ სუპერნატანტის სითხე 200-350 μl მოცულობით ძალიან ფრთხილად (მოკიდებული ნაწილაკებისა და ცხიმის წვეთების თავიდან აცილების მიზნით) ფილტრებით ცალკეული წვერების გამოყენებით და გადაიტანეთ ახალ მილებში. დაასხით წვეთები მორევით.

9. ხელახლა გააჩერეთ უნივერსალური სორბენტი, ენერგიულად ურიეთ მორევის გამოყენებით. დაამატეთ 25 μl ხელახალი უნივერსალური სორბენტი თითოეულ მილს ცალკე წვერით, მჭიდროდ დახურეთ სახურავები.

აურიეთ მორევით, დატოვეთ თაროში 10 წუთის განმავლობაში, ურიეთ ყოველ 2 წუთში.

შესაძლებელია გამოცდისა და საკონტროლო ნიმუშების მოცულობის შეცვლა.

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 9 / 15-დან

18. გაიმეორეთ რეცხვის პროცედურა შემდეგი აბზაცებით. 15–16, ამოიღეთ სუპერნატანი მთლიანად.

19. საცდელი მილები ღია ხუფებით მოათავსეთ თერმოსტატში 64 °C ტემპერატურაზე 5–10 წუთის განმავლობაში უნივერსალური სორბენტის გასაშრობად.

20. დაუმატეთ 50-100 მკლ გამორეცხვის ბუფერი B მილებში (იხილეთ ინსტრუქციები გამოყენებული გამაძლიერებელი რეაგენტის ნაკრებისთვის).

აურიეთ მორევით, სანამ სორბენტი სრულად არ შეჩერდება. მოათავსეთ თერმოსტატში 64 °C ტემპერატურაზე 5–10 წუთის განმავლობაში, პერიოდულად ურიეთ (წუთში ერთხელ) მორევის გამოყენებით.

გაწმენდილი დნმ შეიძლება ინახებოდეს 2-დან 8 °C ტემპერატურაზე ერთი კვირის განმავლობაში, მინუს 24-დან მინუს 16 °C ტემპერატურაზე 6 თვის განმავლობაში და არაუმეტეს მინუს 68 °C ტემპერატურაზე ერთი წლის განმავლობაში. ამისათვის საჭიროა, სორბენტის დაჭერის გარეშე, გადავიტანოთ ზენატანი სითხე ახალ სინჯარაში.

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 10 / 15-დან

დნმ-ის ექსტრაქცია საკვები პროდუქტებიდან, ბიოლოგიური დანამატებიდან,

ცხოველთა საკვები ან მცენარეული ნედლეული

ყურადღება! დნმ-ის ექსტრაქციისთვის ბიოლოგიური მასალის მომზადების პროცედურისა და ტესტის ნიმუშის მოცულობისთვის იხილეთ გამოყენებული გამაძლიერებელი რეაგენტის ნაკრების ინსტრუქციები.

1. გაათბეთ ლიზისის რეაგენტის ბუფერი და სარეცხი ხსნარი 1, თუ ისინი ინახება 2-დან 8 °C ტემპერატურაზე, 64 °C ტემპერატურაზე, სანამ კრისტალები მთლიანად არ დაიშლება.

2. მოათავსეთ 1,5 მლ მილები წინასწარ დამუშავებული ტესტის ნიმუშებით თაროში (ნიმუშის მოცულობა/რაოდენობა, იხილეთ ინსტრუქციები გამოყენებული გამაძლიერებელი რეაგენტის ნაკრებისთვის).

3. მოამზადეთ 1,5 მლ ერთჯერადი პოლიპროპილენის მილაკი ხრახნიანი ან მჭიდროდ დამაგრებული თავსახურით უარყოფითი ამოღების კონტროლისთვის (EC). დაამატეთ 100 μl OKO სინჯარაში.

4. დაამატეთ 400 μl ბუფერი ლიზისის რეაგენტისთვის და 17 μl ლიზისის რეაგენტი ტესტის ნიმუშებთან და TC-თან ერთად სინჯებს.

5. მჭიდროდ დაახურეთ სახურავები, კარგად აურიეთ და წვეთები მორევით.

მილები მოათავსეთ თერმოსტატში 64 °C ტემპერატურაზე 1 საათის განმავლობაში, პერიოდულად აურიეთ მორევით (5-ჯერ ყოველ 10-12 წუთში), ან გამოიყენეთ შეიკერის თერმოსტატი.

6. გრანულების გაუხსნელი ნიმუშის ნაწილაკები ცენტრიფუგირებით 5 წუთის განმავლობაში 10 ათასი გ-ზე (მაგალითად, 12 ათასი rpm MiniSpin მიკროცენტრიფუგასთვის, Eppendorf Manufacturing Corporation).

7. აირჩიეთ საჭირო რაოდენობის ახალი 1,5 მლ ერთჯერადი პოლიპროპილენის მილები ხრახნიანი ან მჭიდროდ დამაგრებული თავსახურებით.

8. ხელახლა შეაჩერეთ უნივერსალური სორბენტი, ენერგიულად ურიეთ მორევის გამოყენებით. დაამატეთ 25 μl ხელახალი უნივერსალური სორბენტი თითოეულ მილს ცალკე წვერით, მჭიდროდ დახურეთ სახურავები.

9. ლიზირებული ნიმუშების მილებიდან ძალიან ფრთხილად აიღეთ ზენატანი სითხე 200–350 μl მოცულობით (შეჩერებული ნაწილაკების და ცხიმის წვეთების შეღწევის თავიდან ასაცილებლად) ცალკე ფილტრებით და გადაიტანეთ მილებში სორბენტით. აურიეთ მორევით, დატოვეთ თაროში 10 წუთის განმავლობაში, ურიეთ ყოველ 2 წუთში.

ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12/27/16 / გვერდი 11 / 15-დან

10.მილაკების ცენტრიფუგა მიკროცენტრიფუგაში 1 წუთის განმავლობაში 2 ათასი გ (მაგალითად, 5 ათასი ბრ/წთ MiniSpin მიკროცენტრიფუგასთვის, Eppendorf Manufacturing Corporation).

11. სორბენტის დაჭერის გარეშე, ამოიღეთ ზედაპირული სითხე თითოეული მილიდან ცალკე წვერით 200 μl ფილტრის გარეშე, ვაკუუმ ასპირატორის გამოყენებით.

12. დაამატეთ 300 მკლ სარეცხი ხსნარი 1 სინჯარებში, მჭიდროდ დაახურეთ სახურავები და მორევით, სანამ უნივერსალური სორბენტი სრულად არ შეჩერდება.

13.მილები გაატარეთ მიკროცენტრიფუგაში 1 წუთის განმავლობაში 2 ათასი გ.

14. სორბენტის დაჭერის გარეშე, ამოიღეთ ზედაპირული სითხე თითოეული მილიდან ცალკე 200 μl წვერით ფილტრის გარეშე, ვაკუუმ ასპირატორის გამოყენებით.

15. დაამატეთ 500 მკლ სარეცხი ხსნარი 2 სინჯარებში, მჭიდროდ დაახურეთ სახურავები და მორევით, სანამ უნივერსალური სორბენტი სრულად არ შეჩერდება.

16.მილების ცენტრიფუგა მიკროცენტრიფუგაში 1 წუთის განმავლობაში 7 ათასი გ (მაგალითად, 10 ათასი ბრ/წთ MiniSpin მიკროცენტრიფუგასთვის, Eppendorf Manufacturing Corporation).

17. სორბენტის დაჭერის გარეშე, ამოიღეთ ზედაპირული სითხე თითოეული მილიდან ცალკე 200 μl წვერით ფილტრის გარეშე, ვაკუუმ ასპირატორის გამოყენებით.

18. გაიმეორეთ რეცხვის პროცედურა შემდეგი აბზაცებით. 15-16, ამოიღეთ სუპერნატანი მთლიანად.

19. საცდელი მილები ღია ხუფებით მოათავსეთ თერმოსტატში 64 °C ტემპერატურაზე 5-10 წუთის განმავლობაში უნივერსალური სორბენტის გასაშრობად.

20. დაამატეთ 50 μl გამორეცხვის ბუფერი B ტუბებში. მოათავსეთ თერმოსტატში 64 °C ტემპერატურაზე 5–10 წუთის განმავლობაში, პერიოდულად ურიეთ (წუთში ერთხელ) მორევის გამოყენებით.

21.მილები გაატარეთ მიკროცენტრიფუგაში 1 წუთის განმავლობაში 10 ათასი გ. სუპერნატანტი შეიცავს გასუფთავებულ დნმ-ს. ნიმუშები მზადაა PCR ტესტირებისთვის.

გაწმენდილი დნმ შეიძლება ინახებოდეს 2-დან 8 °C ტემპერატურაზე ერთი კვირის განმავლობაში, მინუს 24-დან მინუს 16 °C ტემპერატურაზე 6 თვის განმავლობაში და ტემპერატურაზე ფორმა 1: REF K1-6-50-Mod / VER 12 /27/16 / გვერდი 12 15-დან არაუმეტეს მინუს 68 °C მთელი წლის განმავლობაში. ამისათვის საჭიროა, სორბენტის დაჭერის გარეშე, გადავიტანოთ ზენატანი სითხე ახალ სინჯარაში.

ვარგისიანობის ვადა, ტრანსპორტირება და შენახვის პირობები.

საუკეთესოა თარიღამდე. 12 თვე ვადაგასული რეაგენტის ნაკრების გამოყენება შეუძლებელია. გახსნილი რეაგენტების ვარგისიანობის ვადა შეესაბამება გაუხსნელი რეაგენტების ეტიკეტზე მითითებულ ვარგისიანობის თარიღს, თუ სხვა რამ არ არის მითითებული ინსტრუქციებში.

ტრანსპორტირება. რეაგენტის ნაკრები უნდა ინახებოდეს 2-დან 8 C ტემპერატურაზე არაუმეტეს 5 დღის განმავლობაში ცივი ელემენტების შემცველ თერმულ კონტეინერებში, ყველა სახის დაფარული. სატრანსპორტო საშუალება. მიღებისას დაიშალა შენახვის მითითებული ტემპერატურის შესაბამისად.

შენახვა. შეინახეთ რეაგენტის ნაკრები 2-დან 25 C ტემპერატურაზე, გარდა ლიზისის რეაგენტისა. ლიზის რეაგენტი ინახება მაცივარში 2-დან 8C ტემპერატურაზე.

სამაცივრო კამერები უნდა უზრუნველყოფდეს რეგულირებადი ტემპერატურის პირობებს.